本文目錄一覽：
- 1、免疫細胞化學(xué)技術(shù)的標(biāo)本的制備
- 2、PLQ-20K待機狀態(tài)下出現(xiàn)老是要吸紙怎么辦?
- 3、鏈板式盒裝封口機使用注意事項有哪些？
- 4、裝盒機工作原理是什么啊？
- 5、自動裝盒機存在的問題？
- 6、粘盒機高低線不齊怎么調(diào)？
免疫細胞化學(xué)技術(shù)的標(biāo)本的制備
· 標(biāo)本制備恰當(dāng)，是免疫組化成功的首要條件
· 免疫組化對組織和細胞標(biāo)本的要求
– 保持所檢標(biāo)本原有的結(jié)構(gòu)、形態(tài)；
– 在原位最大程度地保持待測抗原(或抗體)的免疫活性，既不淬滅、流失或彌散，也不被隱蔽。
· 免疫組化的組織和細胞標(biāo)本，制作流程與常規(guī)處理方法基本相同，但對組織、細胞的處理又有其特殊要求及注意事項。
– 各種抗原由于其含量及特性的差異對標(biāo)本處理方式常有不同要求，因此要選擇適用于本實驗的最佳方法。
免疫組化中常用的組織和細胞標(biāo)本
· 組織標(biāo)本
– 石蠟切片
– 冰凍切片
· 細胞標(biāo)本
– 組織印片
– 細胞培養(yǎng)片(細胞爬片)
– 細胞涂片 · 石蠟切片是制作組織標(biāo)本最常用、最基本的方法
– 最大優(yōu)點是組織形態(tài)保存好，且能作連續(xù)切片，有利于各種染色對照觀察；
– 石蠟塊還能長期存檔，供回顧研究。
· 石蠟切片制作過程對組織內(nèi)抗原顯現(xiàn)有一定的影響，但可通過某些措施予以改善，因而它是大多數(shù)免疫組化中首選的組織標(biāo)本制作方法。
1、取材的特殊要求及注意事項
· 標(biāo)本新鮮：一般在2h以內(nèi)進行，超過2h，組織將有不同程度的自溶，其抗原或變性消失，或嚴重彌散。
· 取材部位：除取病灶或含待檢抗原部位外，還應(yīng)取病灶與正常交界處，即所取組織切片中同時應(yīng)有抗原陽性和陰性區(qū)，以形成自身對照。
– 細胞壞死后，不僅抗原彌散或消失，而且常引起非特異著色，干擾觀察，因此取材時應(yīng)盡可能避開壞死區(qū)。
1、取材的特殊要求及注意事項(續(xù))
· 避免擠壓：取材時組織受擠壓可使邊緣部細胞形態(tài)改變并加深非特異著色，因而取材時應(yīng)使用鋒利的刀刃；
– 鑷取組織動作要輕；
– 經(jīng)窺鏡直接鉗取的組織往往有過度擠壓，觀察結(jié)果時應(yīng)有所考慮。
2、固定及常用的固定液
· 取材后的組織需立刻投于固定劑中
– 固定使組織和細胞的蛋白質(zhì)凝固，終止內(nèi)源性或外源性酶反應(yīng)，防止組織自溶或異溶，以保持原有結(jié)構(gòu)和形態(tài)；
– 對免疫組化而言更有原位保存抗原的作用，避免抗原失活或彌散。
· 常用固定液：固定劑品種很多，但大多屬于醛類和醇類。其固定原理不同，各有優(yōu)缺點。
– 醛類（常用甲醛、戊二醛和多聚甲醛）
– 醇類（常用乙醇）
– 其它 （丙酮）
(1) 醛類
· 甲醛(福爾馬林)應(yīng)用最廣
– 原理：形成分子間的交聯(lián)，影響蛋白構(gòu)型而使之固定。
– 優(yōu)點：形態(tài)結(jié)構(gòu)保存好，且穿透性強，組織收縮少。
– 缺點：
· 甲醛放置過久可氧化為甲酸，使溶液pH降低，影響染色；
· 醛基與抗原蛋白的氨基交聯(lián)形成羧甲基，使抗原決定簇的三維構(gòu)象出現(xiàn)空間障礙；
· 分子間交聯(lián)形成的網(wǎng)格結(jié)構(gòu)可能部分或完全掩蓋某些抗原決定簇，使之不能充分暴露?？稍斐杉訇幮缘娜旧Y(jié)果。
– 注意事項：
· 縮短固定時間，降低固定溫度(4?C)，為此組織塊不宜過厚。
· 改用中性緩沖福爾馬林，以pH值7.2～7.4 0.01mol/L的磷酸鹽緩沖液配制成10%甲醛固定液，減少固定液pH的變化。
· 固定后充分水洗以減少分子間交聯(lián)。
· 切片在作免疫組化染色前，先經(jīng)預(yù)處理使抗原再現(xiàn)(抗原修復(fù))。
· 戊二醛：
– 穿透性強，微細結(jié)構(gòu)保存好，但對抗原有一定影響，常與其他固定劑聯(lián)合用作免疫電鏡固定液。
· 多聚甲醛(常用4%)：
– 可用于免疫電鏡；也可用于免疫熒光染色。
· 主要檢測組織內(nèi)一些性能嬌弱的抗原特別是細胞表面抗原，例如各類淋巴細胸分化決定簇(CD)、主要組織相容性抗原等。
(2) 醇類
· 最常用的醇類固定劑是乙醇。
– 其固定作用：使細胞內(nèi)蛋白、糖類發(fā)生沉淀。
– 優(yōu)點：穿透性強、抗原性保存好。
– 缺點：
· 脫水性強，易引起組織收縮、變硬，影響切片質(zhì)量，因而乙醇固定時間不宜過長(2h內(nèi))。
· 乙醇使蛋白變性的作用輕，固定后可再溶解；染色過程中，溫育時間長，抗原可流失而減弱反應(yīng)強度。
(3) 其它固定劑
· 丙酮：
– 對抗原性的保存好，但脫水性更強，較少 用于組織標(biāo)本，但細胞爬片常用丙酮固定。
3、抗原修復(fù)——原因
· 常規(guī)的石蠟切片標(biāo)本均用甲醛固定，結(jié)果使得：
– 抗原性物質(zhì)形成醛鍵、羧甲鍵而被封閉了部分抗原決定簇；
– 蛋白之間發(fā)生交聯(lián)而使抗原決定簇隱蔽。
· 要求：在染色時，需要先進行抗原修復(fù)或暴露，即將固定時分子之間所形成的交聯(lián)破壞，而恢復(fù)抗原的原有空間形態(tài)。
3、抗原修復(fù)——方法
· 化學(xué)方法
· 加熱方法
– 水浴加熱法
– 微波照射法
– 高壓加熱法
– 酸水解法
(1) 化學(xué)方法
· 主要是通過一些酶的作用，使抗原決定簇暴露。常用的酶有：胰蛋白酶、胃蛋白酶等。
– 胰蛋白酶：一般使用濃度為0.05%～0.1%，消化時間為37?C，10～40min，主要用于細胞內(nèi)抗原的顯示；
– 胃蛋白酶：一般使用濃度為0.1%～0.4%，消化時間為37?C、30～180min，主要用于細胞間質(zhì)抗原的顯示。
· 例如：Laminin、CollagenIV
(2) 水浴加熱法
· 將玻片放入裝有抗原修復(fù)液的容器中，加熱至沸騰，持續(xù)10～15分鐘。
– 優(yōu)點：操作簡單、經(jīng)濟，適用于所有的實驗室，
– 缺點：對封閉牢固的抗原決定簇暴露不理想。
(3) 微波照射法
· 將玻片放入裝有抗原修復(fù)液的容器中，置微波爐加熱至95℃以上，持續(xù)l0～15分鐘，冷卻后，按免疫組化染色步驟進行。
· 此方法由于微波場內(nèi)極性分子、離子高速運動，撞擊交聯(lián)的網(wǎng)鏈，使抗原異常的構(gòu)想恢復(fù)正常，且因分子運動產(chǎn)熱、效率高、時間短，對抗原再現(xiàn)效果好。
(4) 高壓加熱法暴露抗原
· 將玻片浸入抗原修復(fù)液內(nèi)，置高壓鍋中高壓2～3min，可取得極好的效果。
· 由于高壓下受熱均勻，特別使用于大批量標(biāo)本的染色。
(1) 酸水解法
· 酸水解可使交聯(lián)斷裂、暴露抗原。
· 將玻片浸入1mol/L HCl 溶液中，室溫作用20min(溫度升高，作用時間縮短)。
· 此法能增強特異性染色，降低背景，但需注意水解過度將破壞抗原性及形態(tài)結(jié)構(gòu)。
加熱法的注意事項
· 達到規(guī)定的溫度(92～95?C以上)；
· 維持一定的時間；
· 避免切片干涸 (抗原可能完全丟失)；
· 加熱后必須經(jīng)過室溫自然冷卻20～30分鐘，使未折疊的蛋白分子鏈恢復(fù)天然構(gòu)型；
· 修復(fù)液：
– 最常用的是pH6.0的0.01mol/L的枸櫞酸鹽緩沖液；
– 最新研究表明堿性修復(fù)液更有效，推薦使用1mM的EDTA緩沖液(pH8.0)。
4、載玻片的處理
· 抗原修復(fù)過程中，由于高溫、高壓等諸多固素的影響，極易造成脫片。為防止脫片，常用粘附劑處理載玻片。
– 新載玻片上有油污，要用洗液浸泡12～24h，自來水沖洗后再用蒸餾水清洗；用綢布擦干或烤箱烤干。清潔的載玻片再用粘附劑處理。
· 常用的粘附劑有：
– APES（3-氨丙基三乙氧基硅烷）
– Polv-L-Lysine（多聚賴氨酸）
– 鉻明膠溶液
APES(3-aminopropyltriethoxysilane)
3-氨丙基三乙氧基硅烷
· 現(xiàn)用現(xiàn)配。用純丙酮或甲醇配制2%APES(v/v);
· 將洗凈的玻片浸于此液中20～30秒鐘；
· 取出稍停片刻，再入純丙酮酮溶液洗去未結(jié)合的APES，置通風(fēng)櫥中晾干或60?C烤箱烤干。
Polv-L-Lysine (多聚賴氨酸)
· 將清潔玻片浸于100?g/ml(10%w/v)的多聚賴氨酸溶液中(去離子水稀釋)，37?C放置30min，然后60?C烤箱烘烤1h或室溫過夜干燥。裝盒備用。
鉻明膠溶液
· 試劑：鉻明礬(chrome alum) 0.25g
明膠(gelatine) 2.5g
蒸餾水 500ml
· 先將鉻明礬溶解于40?C少量蒸餾水中，再加入明膠及蒸餾水，可在70 ?C水浴中使明膠溶化，攪拌均勻后，即可使用。如有殘渣，可過濾后再用。
· 用時稍加溶化，切片浸入2～3min，過夜晾干。 · 冰凍切片是指將組織在冷凍狀態(tài)下直接切片。
· 在切片前組織不經(jīng)過任何化學(xué)藥品處理或加熱過程。
– 縮短了制片時間
– 抗原性不受損失
· 對穩(wěn)定性差的抗原，如淋巴細胞表面抗原尤其適合。
· 組織凍結(jié)過程中，細胞內(nèi)、外的水分會形成冰晶，凍結(jié)的速度愈慢，冰晶顆粒愈大，可嚴重影響組織、細胞的形態(tài)結(jié)構(gòu)。因此制備凍塊時要求低溫、速凍。
1、冰凍組織塊的常用方法
· 液氮中冰凍：組織投入液氮中 (一196?C)中10～20sec；
· 干冰中加入丙酮(或異戊烷)，液體立即氣化起泡，溫度降至一70?C ，將組織投入，若在干冰丙酮中置一盛有異戊烷的容器，組織投入該容器內(nèi)結(jié)凍則更好；
– 上述組織在速凍時應(yīng)浸埋于OCT包埋劑或甲基纖維素糊狀液內(nèi)，以保護組織。
– 制成凍塊后若需保存，應(yīng)以鋁箔或塑料薄膜封包，貯存于-70 ?C冰箱。
2、切片
· 供免疫組化用的冰凍切片同樣要求附貼平整，并有連續(xù)性。
· 載玻片也應(yīng)清潔無油污，但一般無需涂抹粘附劑；
· 切片時，使用恒溫冷凍切片機，在箱內(nèi)溫度-25 ?C 。切片厚度一般為4～8?m。
3、切片后處理
· 切好的冰凍切片，室溫下自然晾干1～2h后，入4?C丙酮固定10min，待干燥后作免疫組化染色或封存于-20℃。
· 冰凍切片由于切片技術(shù)要求較高，不易得到連續(xù)性很好的切片，其形態(tài)結(jié)構(gòu)亦不如石蠟片，且凍塊和切片不便于長期貯存，因此冰凍切片的應(yīng)用受限。 · 貼壁細胞培養(yǎng)時，置蓋片于培養(yǎng)瓶中，使細胞在蓋片上生長，達適當(dāng)密度后取出固定(丙酮-20?C固定10～20min)，再進行免疫染色。
– 蓋片的處理方法同載玻片的處理，但泡酸時間2h即可。
– 為了防止細胞脫片，可用多聚賴氨酸處理。 · 大多數(shù)細胞涂片由細胞懸液制成，包括：
– 血液、尿液、腦脊液；
– 體腔積液；
– 組織穿刺吸取，如骨髓、淋巴結(jié)或其他實質(zhì)性組織
– 懸浮培養(yǎng)的細胞或貼壁細胞經(jīng)消化后形成的懸液。 · 細胞涂片的方法：
– 手涂法
· 將細胞濃度調(diào)節(jié)到106/ml左右，可直接涂于載玻片上，但要均勻、不重疊。
· 圖片范圍應(yīng)小于1cm直徑，以節(jié)約試劑。
– 涂片機涂片法
· 將細胞樣品制成2×105～6/ml 細胞懸液，吸取50～100?l (1～2×104～5cells) 加入涂片機內(nèi)，1000rpm離心2min后細胞就均勻分布于玻片上。
PLQ-20K待機狀態(tài)下出現(xiàn)老是要吸紙怎么辦?
普生PLQ-20K針式打印機突然間不進紙解決方法如下：
1、打印紙表面是否平整。如果出現(xiàn)打印機夾紙的現(xiàn)象，首先應(yīng)看打印紙表面 是否平整，如果出現(xiàn)紙張卷曲或褶皺現(xiàn)象，最好換用表面平整、光潔的紙張，并且確保打印紙表面不能有類似膠類的附著物。
2、打印紙?zhí)』蛱?。必須確保打印紙質(zhì)量超過60克以上，打印紙?zhí)⒃斐纱蛴C在走紙時變得困難，容易造成打印機夾紙。而且一次裝入打印紙不能太厚。先檢查一下打印紙的安裝是否符合標(biāo)準，例如裝入位置是否已經(jīng)超出打印機左導(dǎo)軌箭頭標(biāo)志，如果超過的話，必須減少打印紙。
3、取紙輥磨損。取紙輥是激光打印最易磨損的部分。當(dāng)盛紙盤內(nèi)紙張正常，而無法取紙時，往往是取紙輥磨損或彈簧松脫。壓力不夠,不能將紙送入機器。取紙輥磨損，一時無法更換時,可用纏繞橡皮筋的辦法進行應(yīng)急處理。纏繞橡皮筋后，增大了搓紙摩擦力，能使進紙恢復(fù)正常。
4、盛紙盤安裝不正、紙張質(zhì)量不好（過薄、過厚、受潮）等，也都可能造成卡紙或不能取紙的故障。
5、打印紙放入過多。如如果打印機中出現(xiàn)夾紙的話，就會導(dǎo)致不進紙的現(xiàn)象。如果有異物的話，必須要將它排除，排除時一定要先將打印機電源關(guān)閉，然后小心取出異物。如果取出夾紙的話，必須沿出紙方向?qū)A紙緩慢拉出，取出夾紙后還要檢查是否有殘留碎紙存在，并保證將碎紙也清除干凈。
6、打印紙潮濕。如果使用的打印紙存放時間過長，并且表面有潮濕感覺的話，也有可能出現(xiàn)不進紙的現(xiàn)象，此時我們要做的就是要烘干打印紙。
7、墨水是否用完。如果使用的是噴墨打印機，黑色墨盒或彩色墨盒的指示燈閃爍或直亮提示墨水即將用完。如果墨盒為空時，打印機將不能進紙。
鏈板式盒裝封口機使用注意事項有哪些？
行遠包裝鏈板式盒裝封膜機使用注意事項：
此機用前必須接地線。
注意安全，機器內(nèi)部模具有高溫，待機加電狀態(tài)不可將手伸入。
遇到緊急情況，直接拍下紅色急停按鈕。
安裝封口膜時，務(wù)必關(guān)電。
如果第一次封口，溫度要由低到高
擺入機器時四腳一定要先調(diào)水平，地表面要結(jié)實。
要定期在導(dǎo)柱上加黃油，減少零件磨損度。
每天下班清理一下衛(wèi)生，尤其是輸送帶上及電機上。
自動裝盒機存在的問題？
自動裝盒機存在的問題：
（1）機器速度受限于下說明書和下藥板的速度，設(shè)計應(yīng)更加合理；
（2）機器長時間高速運行后穩(wěn)定性比較差，要求運行平穩(wěn)，多使用伺服系統(tǒng)；
（3）長時間運行后精度達不到要求，同步性不好，要求提高可靠性；
（4）對產(chǎn)品的適應(yīng)性低，其功能比較單一，適應(yīng)面比較窄，對待裝的藥品的形狀體積等有較嚴格的規(guī)定；
（5）設(shè)備運行可靠性不高，需要經(jīng)常維修而影響生產(chǎn)進度；
（6）生產(chǎn)效率不高，運行速度慢，自動化程度不高；
（7）裝盒機對說明書的尺寸偏差很敏感，例如對說明書的尺寸偏差要求應(yīng)小于±0.5 mm，在日常生產(chǎn)中會出現(xiàn)因為說明書較薄而卡機的現(xiàn)象。有時會因為紙盒的尺寸出現(xiàn)略微的變化而造成紙盒不易被打開或者卡機的現(xiàn)象。
擴展資料：
自動裝盒機工作原理：
自動裝盒機進料一般分為三個入口：說明書入口、藥瓶入口和機包盒入口。從機包盒進料到最后包裝成型的整個過程大致可以分成四個階段：下盒、打開、裝填、合蓋。下盒動作通常是由一個吸盤從紙盒進料口吸取一個紙盒，下行到裝盒的主線上，由一個導(dǎo)軌卡位將紙盒固定并用一個推板打開紙盒，同時會有兩個可向前移動的卡位從下面升起，從前后方向卡住紙盒的側(cè)面，使盒子打開成直角并前移到裝填區(qū)域。
在裝填區(qū)域填裝后，機器的機構(gòu)會將耳朵折進左右的導(dǎo)軌中，然后再進行合蓋動作。合蓋前機構(gòu)會先彎折紙盒的插舌，然后有一推板推動盒蓋彎折，使插舌插進盒子 中并使鎖扣扣緊。合蓋動作是個關(guān)鍵性的動作，完成的好壞與紙盒的結(jié)構(gòu)和機器調(diào)節(jié)的準確程度有很大關(guān)系。
粘盒機高低線不齊怎么調(diào)？
粘盒機皮帶工作中出現(xiàn)紙板折痕歪斜現(xiàn)象，廠家建議這么做！
粘盒機的應(yīng)用是包裝印刷行業(yè)中用于包裝盒加工的zui后一道工序，主要是用于將印刷好、模切成型的PVC/PET/PP等膠紙盒/紙板折疊成型并粘好糊口，打破了傳統(tǒng)用人手貼膠盒的方法及APET環(huán)保膠盒打膠水時發(fā)白現(xiàn)象，效率高速度快，節(jié)省大量人工，明顯提高了生產(chǎn)效益！但在機器的運轉(zhuǎn)過程中難免會遇到大大小小的故障問題，其中紙盒/板折痕歪斜現(xiàn)象是比較常見的故障現(xiàn)象之一，今天永航小編就針對這個問題提出以下見解，希望可以幫助到大家！
粘盒機皮帶，糊盒機皮帶，印刷機皮帶，橡膠輸紙平皮帶
據(jù)永航小編了解：粘盒機出現(xiàn)折痕歪斜現(xiàn)象，通常是紙板在預(yù)折過程中未按壓痕線進行折疊，才會造成紙板折痕歪斜的故障~
下面是造成紙板折痕歪斜故障的三大原因和相對應(yīng)的解決方法，希望大家在發(fā)現(xiàn)機器故障時及時找出原因并進行處理，以免造成更大的損失！
1.壓痕線太寬或不清晰，導(dǎo)致預(yù)折歪斜；這時由于無法改變壓痕線，只能通過調(diào)節(jié)預(yù)折導(dǎo)桿來彌補。
2.預(yù)折導(dǎo)桿的位置調(diào)節(jié)不當(dāng)，或未固定牢固，導(dǎo)致預(yù)折歪斜；一般通過幾次試調(diào)預(yù)折導(dǎo)桿，檢查折痕準確后，將其鎖緊。
3.兩邊的粘盒機皮帶松緊不一致，使紙板歪斜，導(dǎo)致折疊歪斜；建議調(diào)節(jié)皮帶的繃緊機構(gòu)，消除紙板歪斜。
粘盒機皮帶，糊盒機皮帶，印刷機皮帶，橡膠平皮帶，輸紙平皮帶
高速連續(xù)式裝盒機注意事項的介紹就聊到這里吧，感謝你花時間閱讀本站內(nèi)容，更多關(guān)于多功能自動裝盒機工藝流程、高速連續(xù)式裝盒機注意事項的信息別忘了在本站進行查找喔。